La manifestazione si svolge su un percorso principale che va Siena ad Acquapendente con partenza da Siena la mattina del sabato e arrivo ad Acquapendente nella giornata di domenica, passando per le seguenti località: Grancia di Cuna (Monteroni d’Arbia), Ponte d’Arbia, Buonconvento, Torrenieri (Montalcino), San Quirico d’Orcia, Bagno Vignoni,  Gallina (Castiglione d’Orcia), Radicofani, Celle sul Rigo, Trevinano (San Casciano dei Bagni).

Lungo questo percorso SIAC di 130 km, definito come LA GRANDE SFIDA DEI 130 KM;  si sviluppano sette diverse tratte parziali:

• Siena Cuna SICU di circa 20 km partenza da Siena la mattina del sabato
• Siena Buonconvento SIBU di circa 35 km partenza da Siena la mattina del sabato
• Siena San Quirico SISQ di circa 60 km partenza da Siena la mattina del sabato
• Buonconvento San Quirico BUSQ di circa 25 km partenza sabato pomeriggio
• Buonconvento Acquapendente BUAC di circa 95 km partenza sabato pomeriggio
• San Quirico Acquapendente SQAC di circa 70 km partenza da San Quirico nella tarda serata del sabato
• Radicofani Acquapendente RAAC di circa 35 km partenza Radicofani la mattina di domenica

• E’ inoltre prevista una tratta da Abbadia San Salvatore a Acquapendente detta ABAC di circa 45 km con partenza la domenica mattina. Si segue il percorso della variante di Abbadia verso Campiglia d’Orcia e da lì si scende sino ad incontrare il percorso ufficiale della via Francigena (località Pianotta). Qui i camminatori seguono lo stesso percorso della 130 km sino ad Acquapendente.